HLA-DQA1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403480-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HLA-DQA1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HLA-DQA1 Double Nickase Plasmid (h) e il HLA-DQA1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HLA-DQA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HLA-DQA1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403480-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HLA-DQA1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403480-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLA-DQA1 codifica la catena alfa dell’eterodimero HLA-DQ, una molecola del complesso maggiore di istocompatibilità (MHC) di classe II espressa principalmente sulle cellule presentanti l’antigene. Nella via endosomiale di processamento dell’antigene, HLA-DQ presenta ai linfociti T CD4+ peptidi di origine extracellulare, influenzando la selezione timica, la tolleranza immunitaria periferica e l’attivazione dell’immunità adattativa. La variabilità allelica e l’alterata espressione di HLA-DQA1 influenzano i repertori di legame dei peptidi e sono associate alla suscettibilità a patologie immunomediate, incluse l’autoimmunità e l’alloreattività legata ai trapianti. In quanto parte del locus HLA di classe II, HLA-DQA1 è comunemente studiato in contesti di presentazione dell’antigene, polarizzazione dei linfociti T e reti di segnalazione infiammatoria.
HLA-DQA1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HLA-DQA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HLA-DQA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HLA-DQA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HLA-DQA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.