HIVEP3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421334

Panoramica

Hivep3 codifica HIVEP3, un grande fattore di trascrizione a dita di zinco che si lega a elementi del DNA simili a κB e modula programmi di espressione genica responsivi agli stimoli. HIVEP3 è associato alla regolazione di reti di segnalazione immunitarie e infiammatorie, inclusi gli output trascrizionali a valle di NF-κB e di vie correlate che coordinano la produzione di citochine, l’attivazione dei linfociti e le risposte allo stress cellulare. Nei sistemi murini, un’alterata attività di HIVEP3 è stata associata a una disregolazione dell’omeostasi immunitaria e a fenotipi infiammatori, a supporto della sua rilevanza per studi meccanicistici sull’autoimmunità e sull’infiammazione tissutale. Poiché integra un legame al DNA specifico di sequenza con un ampio controllo trascrizionale, Hivep3 viene anche utilizzato come nodo per studiare i circuiti di regolazione genica e le transizioni di stato cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO HIVEP3 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Hivep3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Hivep3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Hivep3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina HIVEP3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Hivep3 per lo studio della segnalazione di HIVEP3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Hivep3 critici per la funzione di HIVEP3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Hivep3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal HIVEP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal HIVEP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Hivep3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal HIVEP3 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR HIVEP3 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Hivep3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Hivep3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.