Plasmide Double Nickase (h) GPR32: sc-405309-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GPR32 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR32 Double Nickase (h) et le plasmide GPR32 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GPR32. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GPR32 | sc-405309-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le GPR32 humain code un récepteur orphelin couplé aux protéines G, impliqué dans la détection de médiateurs lipidiques pro-résolutifs et dans la modulation de l’amplitude et de la durée des réponses inflammatoires. Parmi les liens de signalisation rapportés figurent la modulation, induite par les GPCR, des voies des seconds messagers et des programmes transcriptionnels en aval, qui influencent le trafic des leucocytes, la production de cytokines et les états fonctionnels des macrophages. L’activité de GPR32 a été associée à des processus immunitaires de phase de résolution, en interaction avec des voies qui contrôlent la chimiotaxie, la survie cellulaire et l’homéostasie tissulaire. Des altérations de l’expression de GPR32 ou de son contexte de signalisation ont été étudiées dans des affections liées à l’inflammation, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de la régulation immunitaire.
GPR32 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GPR32 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GPR32. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GPR32. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GPR32.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.