golgin 97CRISPR激活质粒(h): sc-403152-ACT

GOLGA1 编码 golgin 97，这是一种富含于反式高尔基网络（TGN）的卷曲螺旋结构外周膜蛋白，有助于维持高尔基体的结构，并在高尔基体后（post-Golgi）运输过程中支持囊泡系留。通过协调高尔基体、内体与质膜之间的货物分选及逆向运输通路，golgin 97 有助于维持膜系统稳态以及分泌通路组织的准确性。高尔基体系留与转运因子的扰动与受体回收改变、应激反应以及糖基化酶错位等过程相关；这些过程常在神经退行性疾病、感染生物学和癌细胞表型研究中被重点考察。作为 TGN 动态的标记物与调控因子，golgin 97 常用于细胞应激条件下的细胞器结构、囊泡运输动力学以及蛋白质稳态相关实验。

golgin 97 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性GOLGA1的表达。

golgin 97 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的GOLGA1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于GOLGA1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性golgin 97表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的GOLGA1位点，并能够研究内源性位点上依赖于golgin 97的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在GOLGA1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟golgin 97通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。