Ggnbp2 Plasmide Double Nickase (m): sc-432161-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ggnbp2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ggnbp2 Double Nickase Plasmid (m) e il Ggnbp2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ggnbp2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ggnbp2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-432161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ggnbp2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-432161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Ggnbp2 (gametogenetin binding protein 2) codifica una proteina a localizzazione prevalentemente nucleare, implicata nella regolazione della trascrizione e in processi associati alla cromatina, con ruoli riportati nella progressione del ciclo cellulare e nella stabilità del genoma. L’espressione è stata osservata in tessuti proliferativi e riproduttivi, a supporto dell’interesse per Ggnbp2 nello sviluppo della linea germinale e nel controllo mitotico. Un’attività alterata di GGNBP2 è stata associata in letteratura a proliferazione disregolata e fenotipi oncogenici, rendendola rilevante per studi sulle reti a funzione oncosoppressiva e sui programmi di differenziamento. L’analisi funzionale di Ggnbp2 può chiarire come i fattori regolatori nucleari integrino segnali di pathway con l’espressione genica e l’omeostasi cellulare.
Ggnbp2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ggnbp2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ggnbp2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ggnbp2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ggnbp2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.