Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GBP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-420501-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GBP2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GBP2 Double Nickase Plasmid (m) e il GBP2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Gbp2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GBP2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420501-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Gbp2** codifica la proteina legante il guanilato 2 (GBP2), una grande GTPasi inducibile dall’interferone che partecipa all’immunità cellula-intrinseca. GBP2 è sovraespressa a valle della segnalazione degli interferoni di tipo I e II tramite le vie JAK–STAT e sostiene la difesa antimicrobica modulando programmi di restrizione dei patogeni, il traffico vescicolare e risposte associate all’inflammasoma. Nei tessuti immunitari e di barriera, GBP2 contribuisce a reti di segnalazione infiammatoria che plasmano le interazioni ospite–patogeno e può influenzare fenotipi rilevanti per la malattia legati a risposte interferoniche deregolate. Poiché i membri della famiglia GBP si intersecano con il sensing immunitario innato e con programmi trascrizionali guidati dalle citochine, la perturbazione di **Gbp2** è utile per analizzare la funzione dei geni stimolati dall’interferone in modelli di infezione, infiammazione e immunometabolismo.
GBP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Gbp2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Gbp2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Gbp2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Gbp2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.