GalNAc-T9 Plasmide Double Nickase (h): sc-412077-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GalNAc-T9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GalNAc-T9 Double Nickase Plasmid (h) e il GalNAc-T9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GALNT9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GalNAc-T9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412077-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GALNT9** codifica la polipeptide **N-acetilgalattosaminiltransferasi 9 (GalNAc-T9)**, un enzima iniziale della **O-glicosilazione di tipo mucinico** localizzato nell’apparato di Golgi, che trasferisce GalNAc su residui di Ser/Thr di proteine secrete e di membrana. Modellando i pattern di inizio della O-glicosilazione, GalNAc-T9 influenza la maturazione e il traffico delle proteine, nonché la presentazione dei glicani sulla superficie cellulare, con effetti sulla segnalazione dei recettori e sulle interazioni cellula–cellula o cellula–matrice. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di **GALNT9** sono state associate al rimodellamento della glicosilazione osservato nella trasformazione oncogena e nella progressione tumorale, rendendolo rilevante per studi di biologia epiteliale, adesione e fenotipi metastatici. Il gene è inoltre di interesse per chiarire come la glicosilazione regoli il riconoscimento immunitario e i segnali provenienti dal microambiente extracellulare.
GalNAc-T9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GALNT9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GALNT9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GALNT9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GALNT9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.