FOXF2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420374

Descripción general

Forkhead box F2 (Foxf2) codifica el factor de transcripción FOXF2, un regulador enriquecido en el mesénquima de programas génicos del desarrollo que determinan el patrón tisular, la organización de la matriz extracelular y la señalización epitelio‑mesénquima. En el ratón, la actividad de Foxf2 contribuye a la organogénesis y a la diferenciación del estroma al controlar redes transcripcionales aguas abajo de señales morfogénicas, incluidas vías asociadas con la señalización de TGF‑β/BMP, la modulación de Wnt y la remodelación del citoesqueleto y de la MEC. La desregulación de la transcripción dependiente de FOXF2 se ha vinculado en la literatura con un comportamiento alterado de los fibroblastos, una arquitectura tisular aberrante y cambios en compartimentos estromales asociados a barrera y a vasculatura, lo que respalda su relevancia en fenotipos de remodelación relacionados con enfermedad. Como nodo en la regulación génica del desarrollo y del estroma, Foxf2 se estudia con frecuencia en contextos como respuestas tipo fibrosis, interacciones tumor‑estroma y anomalías del desarrollo en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FOXF2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Foxf2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Foxf2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Foxf2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FOXF2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Foxf2 para la investigación de la señalización de FOXF2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Foxf2 críticos para la función de FOXF2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Foxf2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FOXF2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FOXF2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Foxf2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FOXF2 (m) y el plásmido HDR FOXF2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Foxf2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Foxf2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.