FOXD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-410785-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXD2 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXD2 codifica un fattore di trascrizione della famiglia forkhead box (FOX) che si lega al DNA tramite un dominio forkhead/winged-helix conservato per regolare programmi di espressione genica specifici del tipo cellulare. FOXD2 è implicato in reti trascrizionali associate allo sviluppo e alla differenziazione, coordinando le decisioni di linea cellulare e il mantenimento dell’identità cellulare attraverso la modulazione dell’attività di promotori ed enhancer. In quanto regolatore trascrizionale, un’alterazione dell’attività di FOXD2 può perturbare le vie a valle che controllano proliferazione, apoptosi e morfogenesi, rendendolo rilevante per studi sulla disregolazione dell’espressione genica in contesti patologici. La sua funzione nucleare e la sua capacità di regolazione su molteplici loci bersaglio supportano lo studio delle reti geniche dipendenti da FOXD2, delle transizioni dello stato della cromatina e del controllo trascrizionale dipendente dal contesto.
FOXD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.