Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FcRn Plasmide Double Nickase (m): sc-420308-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FcRn Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FcRn Double Nickase Plasmid (m) e il FcRn Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Fcgrt. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FcRn Antibody (A-6): sc-393064
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FcRn Plasmide Double Nickase (m) | sc-420308-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FcRn Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420308-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Fcgrt** codifica il recettore neonatale per la porzione Fc (FcRn), una molecola correlata all’MHC di classe I che lega IgG e albumina in modo dipendente dal pH, regolando il loro traffico intracellulare e l’emivita sistemica. FcRn svolge un ruolo di primo piano nelle vie endosomiali di smistamento e riciclo, limitando la degradazione lisosomiale e favorendo la transcitosi attraverso epiteli ed endoteli polarizzati. Attraverso questi processi, FcRn influenza l’immunità umorale, la gestione degli antigeni e la distribuzione tissutale delle immunoglobuline, con implicazioni per meccanismi infiammatori e autoimmuni guidati dall’omeostasi delle IgG. Un’attività dis-regolata di FcRn è stata associata a una persistenza alterata delle IgG e alla biologia dei complessi immuni, rendendo **Fcgrt** un bersaglio utile per studiare la regolazione immunitaria Fc-dipendente in modelli murini.
FcRn Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Fcgrt nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Fcgrt. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Fcgrt. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Fcgrt interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.