ERV3 Plasmide Double Nickase (h): sc-410773-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ERV3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ERV3 Double Nickase Plasmid (h) e il ERV3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ERV3-1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ERV3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERV3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERV3-1 codifica ERV3, una proteina di tipo envelope derivata da un elemento retrovirale endogeno che risulta trascrizionalmente attivo in specifici tessuti umani. In quanto prodotto genico associato a un retroelemento, ERV3 è stata studiata nel contesto delle interazioni ospite–retroelemento, della regolazione dell’espressione genica e di programmi cellulari legati alla differenziazione e alla segnalazione immunitaria. L’espressione di ERV3 è stata riportata in contesti ematopoietici e placentari, stimolando ricerche su come gli envelope retrovirali endogeni interagiscano con le vie dell’immunità innata e con processi associati alla membrana. In letteratura, un’espressione deregolata dei geni retrovirali endogeni, incluso ERV3-1, è stata associata a contesti infiammatori e oncologici, supportandone l’impiego come bersaglio per studi meccanicistici di stati trascrizionali rilevanti per la malattia.
ERV3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ERV3-1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ERV3-1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ERV3-1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ERV3-1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.