EphA10 Plasmide Double Nickase (h): sc-407999-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EphA10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il EphA10 Double Nickase Plasmid (h) e il EphA10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EPHA10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EphA10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407999-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA10 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407999-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHA10 codifica EphA10, un membro della famiglia dei recettori tirosin-chinasici Eph che partecipa alla comunicazione cellula-cellula attraverso una segnalazione dipendente dalle efrine. Le vie associate a EphA10 regolano segnali guida dipendenti dal contatto, il rimodellamento del citoscheletro e le dinamiche di adesione che plasmano la migrazione cellulare e l’organizzazione dei tessuti durante lo sviluppo e negli epiteli adulti. Come per altri recettori Eph, alterazioni dell’espressione o dell’equilibrio della segnalazione possono perturbare la formazione dei confini e i programmi di motilità legati alla progressione oncogena e al comportamento metastatico. EPHA10 è pertanto studiato nel contesto delle reti di recettori tirosin-chinasici, della plasticità epiteliale e del rimodellamento delle vie di segnalazione associato al cancro.
EphA10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EPHA10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EPHA10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EPHA10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EPHA10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.