Emx1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420169

Descripción general

EMX1 (empty spiracles homeobox 1) es un factor de transcripción homeobox de tipo paired-like que participa en el patrón temprano del telencéfalo y en la arealización neocortical durante el desarrollo embrionario del ratón. Regula programas de expresión génica que controlan la proliferación de progenitores neurales, la diferenciación neuronal y la laminación cortical, integrándose con redes de señalización del desarrollo como WNT/β-catenina y SHH que determinan la identidad regional del prosencéfalo. La expresión de Emx1 se utiliza ampliamente como marcador de linajes del telencéfalo dorsal, lo que permite estudios mecanísticos de la corticogénesis y del ensamblaje de circuitos. La desregulación de redes transcripcionales asociadas a EMX1 es relevante para fenotipos del neurodesarrollo que afectan la estructura cerebral y la especificación del linaje de neuronas excitadoras.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Emx1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Emx1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Emx1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Emx1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Emx1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Emx1 para la investigación de la señalización de Emx1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Emx1 críticos para la función de Emx1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Emx1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Emx1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Emx1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Emx1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Emx1 (m) y el plásmido HDR Emx1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Emx1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Emx1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.