Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (m): sc-419369-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il EMMPRIN/CD147 Double Nickase Plasmid (m) e il EMMPRIN/CD147 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bsg. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: EMMPRIN/CD147 Antibody (B-5): sc-46700
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419369-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419369-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Basigina (Bsg), nota anche come EMMPRIN/CD147, è una glicoproteina della superfamiglia delle immunoglobuline ampiamente espressa, che regola le interazioni cellula–cellula e l’organizzazione delle proteine di membrana sulla superficie cellulare. Nelle cellule murine funge da chaperone essenziale per i trasportatori di monocarbossilati (MCT1/MCT4), supportando il trasporto di lattato e il metabolismo glicolitico, e modula il rimodellamento della matrice extracellulare attraverso l’induzione di metalloproteinasi della matrice in contesti stromali e immunitari. CD147 partecipa inoltre a vie di segnalazione collegate a integrine e MAPK che influenzano adesione, migrazione e risposte infiammatorie. Un’attività deregolata di Bsg/CD147 è stata associata al rimodellamento del microambiente tumorale, a fenotipi fibrotici e infiammatori e ad alterazioni dell’accoppiamento metabolico in tessuti rilevanti per la malattia.
EMMPRIN/CD147 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bsg nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bsg. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bsg. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bsg interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.