Plásmido Doble Nickase (m) EMMPRIN/CD147: sc-419369-NIC

Basigina (Bsg), también conocida como EMMPRIN/CD147, es una glicoproteína de la superfamilia de las inmunoglobulinas, ampliamente expresada, que regula las interacciones célula–célula y la organización de proteínas de membrana en la superficie celular. En células de ratón funciona como una chaperona esencial de los transportadores de monocarboxilatos (MCT1/MCT4), favoreciendo el transporte de lactato y el metabolismo glucolítico, y modula la remodelación de la matriz extracelular mediante la inducción de metaloproteinasas de matriz en contextos estromales e inmunitarios. CD147 también participa en señales vinculadas a integrinas y a MAPK que influyen en la adhesión, la migración y las respuestas inflamatorias. La actividad desregulada de Bsg/CD147 se ha asociado con la remodelación del microambiente tumoral, fenotipos fibróticos e inflamatorios y un acoplamiento metabólico alterado en tejidos relevantes para la enfermedad.

EMMPRIN/CD147 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Bsg en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Bsg. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Bsg. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Bsg alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.