Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
eIF4AII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402758
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF4AII O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eIF4AII, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF4AII Anticorpo (H-5): sc-137148
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4AII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402758 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
EIF4A2 codifica a helicase de RNA humana dependente de ATP eIF4AII, um componente central da maquinaria de iniciação da tradução eIF4F que remodela a estrutura secundária da UTR 5′ para facilitar o escaneamento do ribossomo dependente de cap. Ao controlar o recrutamento de mRNA e o reconhecimento do códon de início, a eIF4AII influencia programas de síntese proteica globais e seletivos por transcrito, ligados ao crescimento celular, à adaptação ao estresse e à diferenciação. Sua atividade intersecciona vias do metabolismo de RNA e nós de controle translacional que integram sinais a montante que afetam proliferação e sobrevivência. A iniciação da tradução desregulada, incluindo alterações na função da família eIF4A, é frequentemente implicada na remodelação oncogênica do proteoma e em outros distúrbios associados à regulação aberrante de mRNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eIF4AII (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EIF4A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EIF4A2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EIF4A2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eIF4AII.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EIF4A2 para a investigação da sinalização de eIF4AII, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EIF4A2 críticos para a função eIF4AII
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EIF4A2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eIF4AII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo eIF4AII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EIF4A2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eIF4AII Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR eIF4AII (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EIF4A2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EIF4A2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.