DTX3L Plasmide Double Nickase (h): sc-403953-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DTX3L Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DTX3L Double Nickase Plasmid (h) e il DTX3L Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DTX3L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DTX3L Antibody (D-10): sc-514776
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DTX3L Plasmide Double Nickase (h) | sc-403953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DTX3L Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (deltex E3 ubiquitin ligase 3L) codifica una ligasi E3 dell’ubiquitina che coopera con PARP9 per regolare l’ubiquitinazione proteica in risposta alla segnalazione dell’interferone e allo stress cellulare. Attraverso la modulazione del turnover proteico dipendente dall’ubiquitina e di processi associati al danno al DNA, DTX3L influenza le vie dell’immunità innata, la segnalazione legata alla cromatina e il mantenimento dell’integrità del genoma. La sua attività è stata collegata alla regolazione di programmi trascrizionali infiammatori e delle risposte all’infezione virale, rendendola rilevante per studi sull’omeostasi immunitaria. Un’alterata espressione di DTX3L o il coinvolgimento delle relative vie è stato riportato in diversi contesti patologici, inclusi la segnalazione associata al cancro e la disregolazione immunitaria, a supporto di indagini meccanicistiche in modelli cellulari umani.
DTX3L Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DTX3L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DTX3L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DTX3L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DTX3L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.