DMRT2 Plasmide Double Nickase (m): sc-432587-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DMRT2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DMRT2 Double Nickase Plasmid (m) e il DMRT2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Dmrt2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DMRT2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-432587-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DMRT2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-432587-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dmrt2 codifica DMRT2, un fattore di trascrizione con dominio DM che regola programmi di patterning embrionale, inclusi la somitogenesi e lo sviluppo dello scheletro assiale, coordinando reti trascrizionali specifiche di linea cellulare. Nel topo, DMRT2 contribuisce alla polarità dei somiti e ai segnali di asimmetria sinistra-destra che modellano l’organizzazione muscoloscheletrica durante le prime fasi dello sviluppo. La sua attività interseca vie di segnalazione dello sviluppo che governano la differenziazione del mesoderma e la tempistica morfogenetica, rendendolo un nodo utile per studiare il controllo trascrizionale della specificazione tissutale. Un’alterata funzione di Dmrt2 è stata collegata ad anomalie congenite dello sviluppo in sistemi modello, a supporto della sua rilevanza per studi meccanicistici dei circuiti di regolazione genica alla base della morfogenesi.
DMRT2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Dmrt2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Dmrt2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Dmrt2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Dmrt2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.