Plasmide Double Nickase (h) Dlx-6: sc-405663-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Dlx-6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Dlx-6 Double Nickase (h) et le plasmide Dlx-6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DLX6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Dlx-6 Antibody (2D7): sc-517058
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Dlx-6 | sc-405663-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Dlx-6 | sc-405663-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLX6 code Dlx-6, un facteur de transcription à homéoboîte qui contribue à coordonner des programmes transcriptionnels au cours du développement embryonnaire, avec des rôles majeurs dans la structuration craniofaciale, la différenciation neuronale et la morphogenèse des membres. Dlx-6 agit dans le noyau en se liant à des éléments régulateurs de l’ADN et en interagissant avec des réseaux de signalisation du développement, notamment des voies qui recoupent des signaux de structuration dépendants de WNT, BMP et SHH. Une régulation altérée de DLX6 a été associée à une spécification de lignée dérégulée et à des états d’expression génique aberrants observés dans des troubles du développement et dans des contextes liés à la biologie du cancer. En tant que régulateur transcriptionnel spécifique de séquence, DLX6 est fréquemment étudié pour sa contribution aux décisions de destin cellulaire, à l’activité des enhancers et au contrôle épigénétique des réseaux géniques du développement.
Dlx-6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DLX6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DLX6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DLX6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DLX6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.