Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
DAGLα Plasmide Double Nickase (h): sc-402826-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DAGLα Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DAGLα Double Nickase Plasmid (h) e il DAGLα Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DAGLA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DAGLα Antibody (E-6): sc-390409
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DAGLα Plasmide Double Nickase (h) | sc-402826-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DAGLα Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402826-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DAGLA codifica la diacilglicerolo lipasi alfa (DAGLα), un’idrolasi serinica associata alla membrana che catalizza la formazione dell’endocannabinoide 2-arachidonoilglicerolo (2-AG) a partire dal diacilglicerolo. Controllando la disponibilità di 2-AG, DAGLα regola la segnalazione dei recettori dei cannabinoidi e la plasticità sinaptica, collegando il metabolismo dei fosfolipidi alle reti di segnalazione neuromodulatorie. L’attività di DAGLα si integra con le vie dei secondi messaggeri lipidici, inclusi il turnover del diacilglicerolo dipendente da PLC e il conseguente equilibrio tra eicosanoidi ed endocannabinoidi. La disregolazione della segnalazione endocannabinoide e dell’omeostasi lipidica che coinvolge DAGLA è stata studiata in relazione a fenotipi del neurosviluppo e neuropsichiatrici, oltre che in ambiti più ampi della biologia metabolica e infiammatoria.
DAGLα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DAGLA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DAGLA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DAGLA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DAGLA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.