CYP2A6 Plasmide Double Nickase (h): sc-403448-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP2A6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP2A6 Double Nickase Plasmid (h) e il CYP2A6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CYP2A6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP2A6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403448-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP2A6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403448-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il CYP2A6 umano codifica una monoossigenasi microsomiale del citocromo P450 che catalizza il metabolismo ossidativo di diversi xenobiotici e substrati endogeni, contribuendo alla capacità di detossificazione epatica e alla variabilità interindividuale nella clearance dei farmaci. Il CYP2A6 è un catalizzatore principale dell’ossidazione della nicotina (C-ossidazione) a cotinina e partecipa anche all’attivazione/inattivazione metabolica di molte sostanze chimiche ambientali attraverso un trasferimento di elettroni dipendente dalla NADPH–citocromo P450 reduttasi. La sua attività si integra con le reti di risposta agli xenobiotici e con l’omeostasi metabolica epatica, includendo vie che regolano l’equilibrio redox e la gestione degli elettrofili. Polimorfismi genetici e un’espressione alterata di CYP2A6 sono stati associati alla variabilità dei fenotipi di dipendenza da nicotina e a una diversa suscettibilità allo stress tissutale indotto da tossici, supportandone l’impiego nella ricerca di farmacogenomica e tossicologia.
CYP2A6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CYP2A6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CYP2A6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CYP2A6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CYP2A6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.