Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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cyclin D3 Plasmide Double Nickase (h): sc-400634-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- cyclin D3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il cyclin D3 Double Nickase Plasmid (h) e il cyclin D3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CCND3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: cyclin D3 Antibody (D-7): sc-6283
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
cyclin D3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400634-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin D3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400634-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCND3 codifica la ciclina D3, una ciclina regolatoria che si associa a CDK4/6 per fosforilare le proteine della famiglia RB e favorire la progressione del ciclo cellulare dalla fase G1 alla fase S. Integrando i segnali mitogenici con programmi trascrizionali, la ciclina D3 contribuisce al controllo dei checkpoint, alla proliferazione e alla differenziazione specifica di linea, in particolare in contesti ematopoietici. Un’attività deregolata di CCND3 è collegata a un ingresso anomalo nel ciclo cellulare e all’instabilità genomica osservati in molteplici modelli associati a neoplasie, rendendolo un nodo comune negli studi sul controllo della crescita cellulare e sulle vie di segnalazione oncogeniche.
cyclin D3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CCND3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CCND3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CCND3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CCND3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.