CXCR-4 Particelle di Attivazione Lentivirale (h): sc-400254-LAC

Il gene umano **CXCR4** codifica **CXCR-4**, un recettore delle chemochine a sette domini transmembrana che lega **CXCL12/SDF-1** per coordinare chemiotassi, ritenzione cellulare e adesione nei compartimenti ematopoietico e immunitario. La segnalazione di CXCR4 attiva vie accoppiate a proteine G, tra cui **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK**, **PLCβ** con flusso di **Ca²⁺** e il traffico recettoriale dipendente da **β-arrestina**, modellando migrazione, sopravvivenza e dinamiche del citoscheletro. Un’attività deregolata di CXCR4 è implicata in un homing leucocitario aberrante e in segnali infiammatori, ed è frequentemente studiata nel contesto dell’invasione tumorale, delle interazioni con la nicchia metastatica e del crosstalk con il microambiente. In quanto recettore di superficie che integra gradienti di chemochine, **CXCR-4** è ampiamente utilizzato come nodo funzionale per analizzare saggi di migrazione, internalizzazione del recettore e programmi trascrizionali a valle.

Le particelle di attivazione lentivirale CXCR-4 (h) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di CXCR4 in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale CXCR-4 (h) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione CXCR4, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di CXCR-4. L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo CXCR4 e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.