Date published: 2026-7-10

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CtBP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401865-NIC

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Schede Tecniche
  • Specie Target: human
  • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
  • CtBP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
  • Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
  • Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
  • Il CtBP2 Double Nickase Plasmid (h) e il CtBP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTBP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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    CtBP2 Plasmide Double Nickase (h)

    sc-401865-NIC
    20 µg
    $410.00

    CtBP2 Plasmide Double Nickase (h2)

    sc-401865-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    Il gene umano **CTBP2** codifica la **C-terminal binding protein 2 (CtBP2)**, un coregolatore trascrizionale sensibile al **NADH** che agisce principalmente come **corepressore** reclutando complessi che modificano la cromatina, inclusi le **HDAC** e altri regolatori epigenetici, su fattori di trascrizione specifici per sequenza. CtBP2 influenza programmi genici che controllano proliferazione, specificazione di linea, transizione epitelio–mesenchimale e apoptosi, collegando lo stato metabolico cellulare all’output trascrizionale. Attraverso queste attività, CtBP2 modula vie come **Wnt/β-catenina**, **TGF-β** e reti trascrizionali associate all’ipossia, contribuendo anche a definire l’accessibilità della cromatina e l’attività degli enhancer. Un’espressione o una funzione deregolata di CTBP2 è stata associata ad alterazioni della differenziazione e a stati trascrizionali legati ai tumori, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla repressione trascrizionale e sul controllo metabolico della regolazione genica.

    CtBP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTBP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTBP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTBP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

    Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTBP2 interrotto.

    Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.