CREB3L4 Plasmide Double Nickase (h): sc-417626-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CREB3L4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CREB3L4 Double Nickase Plasmid (h) e il CREB3L4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CREB3L4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CREB3L4 Antibody (D-8): sc-514052
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CREB3L4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CREB3L4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB3L4 (cAMP responsive element binding protein 3-like 4) è un fattore di trascrizione bZIP ancorato alla membrana del reticolo endoplasmatico (RE) che può essere attivato tramite proteolisi intramembrana regolata per modulare programmi di espressione genica legati all’omeostasi della via secretoria. Partecipa a risposte cellulari connesse alla segnalazione dello stress del RE e a reti trascrizionali associate alla risposta alle proteine mal ripiegate (UPR), influenzando la differenziazione e l’adattamento metabolico. L’attività di CREB3L4 è stata studiata in tessuti sensibili agli ormoni e in vari tumori, dove un’alterata espressione o modifiche degli output trascrizionali a valle possono correlare con cambiamenti nella proliferazione, nella segnalazione di sopravvivenza e in fenotipi invasivi. Queste caratteristiche rendono CREB3L4 un bersaglio utile per analizzare i meccanismi di controllo trascrizionale che collegano la funzione del RE a stati cellulari associati alla malattia.
CREB3L4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CREB3L4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CREB3L4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CREB3L4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CREB3L4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.