Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CPS1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402014-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CPS1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CPS1 Double Nickase Plasmid (h) e il CPS1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CPS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CPS1 Antibody (B-1): sc-376190
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CPS1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPS1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La carbamoil-fosfato sintetasi 1 (CPS1) codifica l’enzima mitocondriale che catalizza la tappa limitante della velocità del ciclo dell’urea, convertendo ammoniaca e bicarbonato in carbamoil fosfato in una reazione dipendente dall’ATP. Regolando lo smaltimento dell’azoto e la biosintesi dell’arginina, CPS1 collega il metabolismo mitocondriale ai processi di detossificazione epatocellulare e a reti metaboliche più ampie di amminoacidi e nucleotidi. Un’attività alterata di CPS1 è associata a iperammoniemia e a disturbi del ciclo dell’urea, e la sua espressione può essere rimodellata nelle malattie metaboliche e nel cancro per sostenere cambiamenti nella gestione dell’azoto. Queste proprietà rendono CPS1 un bersaglio rilevante per analizzare il flusso mitocondriale dell’azoto, la regolazione del ciclo dell’urea e il rimodellamento metabolico in modelli cellulari umani.
CPS1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CPS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CPS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CPS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CPS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.