Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CEP55 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-417522
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CEP55 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CEP55, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CEP55 Antibody (B-8): sc-374051
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CEP55 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-417522 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CEP55 (proteina centrosomiale 55) è un regolatore della citocinesi che si localizza ai centrosomi e al corpo intermedio (midbody), dove favorisce l’abscissione coordinando il reclutamento del macchinario ESCRT durante la mitosi tardiva. Attraverso interazioni con proteine di impalcatura del midbody e fattori di rimodellamento della membrana, CEP55 contribuisce a garantire una divisione cellulare fedele, la stabilità del genoma e il corretto completamento del ciclo cellulare. Un’espressione deregolata di CEP55 è stata associata a fenotipi proliferativi e a instabilità cromosomica osservati in diversi contesti tumorali, rendendola un nodo utile per lo studio del controllo mitotico. CEP55 è inoltre rilevante per le vie che regolano la dinamica del centrosoma, l’organizzazione del fuso mitotico e le risposte dei checkpoint al fallimento della citocinesi.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CEP55 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CEP55 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CEP55 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CEP55 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CEP55.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CEP55 per lo studio della segnalazione di CEP55, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CEP55 critici per la funzione di CEP55
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CEP55 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CEP55 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CEP55 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CEP55. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CEP55 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CEP55 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CEP55 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CEP55 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.