CELSR3 Plasmide Double Nickase (h): sc-405116-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CELSR3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CELSR3 Double Nickase Plasmid (h) e il CELSR3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CELSR3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CELSR3 Antibody (2F7): sc-293381
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CELSR3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405116-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CELSR3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405116-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CELSR3 codifica il recettore G di tipo G a sette passaggi con domini cadherina/EGF/LAG 3 (cadherin EGF LAG seven-pass G-type receptor 3), una cadherina atipica che funziona come GPCR di adesione sulla superficie cellulare. Partecipa alla segnalazione della polarità cellulare planare (PCP) e alla comunicazione dipendente dal contatto che modella la polarità dei tessuti, la migrazione neuronale e la guida degli assoni durante lo sviluppo. Attraverso interazioni con i componenti principali della PCP e con regolatori del citoscheletro, CELSR3 contribuisce all’orientamento coordinato delle cellule e al patterning dei neuriti. Alterazioni dell’espressione o della regolazione di CELSR3 sono state associate a fenotipi del neurosviluppo e sono state esplorate anche in contesti oncologici, in cui la polarità e l’adesione cellula-cellula influenzano l’invasione e l’architettura tumorale.
CELSR3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CELSR3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CELSR3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CELSR3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CELSR3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.