Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cdk9 Plasmide Double Nickase (m): sc-430774-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Cdk9 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Cdk9 Double Nickase Plasmid (m) e il Cdk9 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cdk9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cdk9 Antibody (D-7): sc-13130
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Cdk9 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430774-NIC | 20 µg | $410.00 |
La chinasi ciclina-dipendente 9 (Cdk9) è la componente catalitica di P-TEFb che fosforila il dominio C-terminale dell’RNA polimerasi II e i fattori negativi dell’elongazione, promuovendo il rilascio dalla pausa trascrizionale e l’elongazione produttiva. Nelle cellule murine, Cdk9 coordina programmi di espressione genica responsivi agli stimoli, integrando input di segnalazione che controllano la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno del DNA e la differenziazione. Attraverso la regolazione dell’elongazione trascrizionale, Cdk9 influenza processi associati alla cromatina e può modulare l’apoptosi e le vie di adattamento allo stress. Un’attività di CDK9 deregolata o un reclutamento anomalo di P-TEFb è associato ad alterazioni del controllo trascrizionale in contesti proliferativi e infiammatori, a supporto del suo studio nelle reti di espressione genica rilevanti per la malattia.
Cdk9 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cdk9 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cdk9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cdk9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cdk9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.