Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CDD Plasmide Double Nickase (h): sc-403915-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CDD Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CDD Double Nickase Plasmid (h) e il CDD Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CDD Antibody (D-5): sc-365292
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CDD Plasmide Double Nickase (h) | sc-403915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDD Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene CDA umano codifica la citidina deaminasi (CDD), un enzima zinco-dipendente che catalizza la deaminazione della citidina e della deossicitidina in uridina e deossiuridina, rispettivamente. Questa attività contribuisce alla via di recupero delle pirimidine e all’omeostasi dei pool nucleotidici, influenzando la fedeltà della replicazione del DNA e le risposte cellulari alla disponibilità di nucleosidi. L’espressione di CDA e la sua attività enzimatica modulano i livelli intracellulari di analoghi della citidina e partecipano a reti metaboliche collegate al trasporto e alla fosforilazione dei nucleosidi. Alterazioni della funzione o dell’espressione di CDA sono state associate a variabilità nel metabolismo dei nucleosidi in ambito oncologico e in contesti ematologici, rendendola rilevante per studi meccanicistici sull’adattamento metabolico e sullo stress genotossico.
CDD Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.