CD6 Plasmide Double Nickase (h): sc-403748-NIC

CD6 è una glicoproteina di superficie espressa prevalentemente sulle cellule T e funge da co-recettore nell’attivazione antigene-dipendente, mediando interazioni adesive e di segnalazione alla sinapsi immunologica, incluso il legame con ALCAM/CD166. Attraverso i suoi motivi di segnalazione citoplasmatici e l’accoppiamento con chinasi e proteine adattatrici, CD6 modula la segnalazione prossimale al TCR, il rimodellamento del citoscheletro e vie a valle come MAPK e NF-κB, che influenzano proliferazione, differenziamento e produzione di citochine delle cellule T. Un’alterata attività di CD6 è stata associata a una disregolazione della tolleranza immunitaria e delle risposte infiammatorie, rendendolo rilevante per studi su autoimmunità e infiammazione cronica. CD6 è inoltre utilizzato come marcatore e nodo funzionale nella biologia dei linfociti, con implicazioni per le interazioni tumore-sistema immunitario e per i meccanismi di evasione immunitaria.

CD6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD6 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.