CD44 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400209-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD44O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD44 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD44 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD44. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD44 Anticorpo (DF1485): sc-7297
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD44 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400209-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD44 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400209-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD44 codifica uma glicoproteína de superfície celular que atua como o principal recetor do hialuronano e de ligandos relacionados da matriz extracelular, coordenando a adesão célula–célula e célula–matriz. Por meio de interações com proteínas ERM e da sinalização de recetores tirosina-quinase, o CD44 contribui para a remodelação do citoesqueleto, a migração e vias de sobrevivência, incluindo a sinalização por GTPases Rho e as cascatas PI3K–AKT e MAPK/ERK. O splicing alternativo e a glicosilação dinâmica geram isoformas de CD44 que influenciam a plasticidade epitélio–mesênquima, o tráfego de células inflamatórias e a remodelação tecidular. A expressão desregulada de CD44 e o uso de isoformas são frequentemente estudados na invasão e metástase do cancro, em fenótipos tipo “stem” e em doenças inflamatórias crónicas.
CD44 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD44 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD44. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD44. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD44 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.