CD38 Plasmide Double Nickase (h): sc-401117-NIC

Il CD38 umano codifica un ectoenzima e recettore multifunzionale che regola il metabolismo del NAD⁺ catalizzando la formazione e l’idrolisi dell’ADP-ribosio ciclico e di metaboliti correlati, plasmando così la mobilizzazione intracellulare di Ca²⁺. Attraverso queste attività, CD38 influenza la trasduzione del segnale associata all’attivazione e alla differenziazione dei linfociti e alla funzione della sinapsi immunologica, e può modulare lo stato redox cellulare e l’efficienza metabolica tramite la disponibilità di NAD⁺. Le vie dipendenti da CD38 intersecano la segnalazione infiammatoria e il traffico delle cellule immunitarie, rendendo CD38 un bersaglio frequente negli studi di immunometabolismo, delle neoplasie ematologiche e dei meccanismi delle malattie infiammatorie croniche. La sua espressione e la sua attività enzimatica vengono inoltre utilizzate per contestualizzare i cambiamenti dello stato cellulare nei microambienti tumorali e durante l’esaurimento o l’attivazione immunitaria.

CD38 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD38 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD38. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD38. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD38 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.