Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD24 Double Nickaseプラスミド (m): sc-419540-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CD24 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CD24ダブルニカースプラスミド（m）およびCD24ダブルニカースプラスミド（m2）は、Cd24aを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CD24 抗体 (SN3): sc-19585
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CD24 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-419540-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD24 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-419540-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cd24aは、GPI（グリコシルホスファチジルイノシトール）アンカー型の細胞表面タンパク質であるCD24をコードしており、CD24は高度に糖鎖修飾された免疫調節分子として、マウスの複数の造血系および上皮系細胞に発現している。CD24は細胞間相互作用や自然免疫・獲得免疫応答の調整に関与し、白血球の活性化、接着動態、分化プログラムに影響を与える。リガンド依存的なシグナル伝達や膜マイクロドメインとの会合を介して、CD24は炎症性シグナル伝達カスケードを形成し、抗原応答性や組織恒常性などの過程に影響を及ぼし得る。Cd24aの発現異常は、疾患に関連する状況における免疫制御の変化や細胞可塑性の変動と関連づけられており、マウスモデル系において炎症関連フェノタイプや腫瘍—免疫相互作用を研究するための分子学的な手がかりとして有用であることが示されている。
CD24 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Cd24a 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Cd24a内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Cd24aの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Cd24aが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。