Plásmido Doble Nickase (h) CD155: sc-404597-NIC

PVR codifica CD155, una molécula de adhesión de superficie celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas que actúa como ligando de DNAM-1 (CD226), TIGIT y CD96 para modular la activación de linfocitos citotóxicos y la señalización de puntos de control inmunitarios. CD155 también participa en interacciones célula–célula y célula–matriz, influyendo en la remodelación de actina, la migración y la inhibición por contacto mediante vías vinculadas a las adhesiones focales y a la dinámica del citoesqueleto. La expresión alterada de PVR/CD155 se ha asociado con la evasión inmunitaria tumoral, la invasión y el comportamiento metastásico, y se examina con frecuencia en el contexto de la vigilancia inmunitaria dentro del microambiente tumoral. Además, CD155 funciona como receptor del poliovirus, lo que la hace relevante para estudios de unión viral, entrada e interacciones huésped–patógeno en células humanas.

CD155 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PVR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PVR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PVR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PVR alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.