CD155 Plasmide Double Nickase (h): sc-404597-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD155 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD155 Double Nickase Plasmid (h) e il CD155 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PVR. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD155 Antibody (SKII.4): sc-53572
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD155 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404597-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD155 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404597-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PVR codifica CD155, una molecola di adesione di superficie cellulare della superfamiglia delle immunoglobuline che funge da ligando per DNAM-1 (CD226), TIGIT e CD96, modulando l’attivazione dei linfociti citotossici e la segnalazione dei checkpoint immunitari. CD155 partecipa anche alle interazioni cellula–cellula e cellula–matrice, influenzando il rimodellamento dell’actina, la migrazione e l’inibizione da contatto attraverso vie legate alle adesioni focali e alla dinamica del citoscheletro. Un’espressione alterata di PVR/CD155 è stata associata all’elusione immunitaria tumorale, all’invasività e al comportamento metastatico, ed è spesso analizzata nel contesto della sorveglianza immunitaria all’interno del microambiente tumorale. Inoltre, CD155 funge da recettore per il poliovirus, risultando quindi rilevante per studi su legame virale, ingresso e interazioni ospite–patogeno nelle cellule umane.
CD155 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PVR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PVR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PVR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PVR interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.