CD109 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-433467
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD109 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CD109, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD109 Antibody (C-9): sc-271085
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD109 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-433467 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Cd109 codifica CD109, una glicoproteina di superficie cellulare ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI) che modula la segnalazione del transforming growth factor-β (TGF-β) influenzando la disponibilità del recettore e la trascrizione a valle dipendente da SMAD. Nelle cellule murine, CD109 è stata associata alla regolazione del comportamento delle cellule epiteliali e stromali, incluso il controllo di proliferazione, differenziamento e rimodellamento della matrice extracellulare. Regolando finemente l’output della via del TGF-β, CD109 può influenzare processi quali la regolazione immunitaria, le risposte alle ferite e le reti di segnalazione associate alla fibrosi. L’alterazione dell’espressione di CD109 e dell’equilibrio della segnalazione viene spesso studiata in contesti di controllo della crescita deregolato e di fenotipi del microambiente associati al tumore in modelli preclinici.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD109 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cd109 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cd109 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cd109 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD109.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cd109 per lo studio della segnalazione di CD109, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Cd109 critici per la funzione di CD109
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cd109 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CD109 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CD109 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cd109. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CD109 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CD109 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cd109 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cd109 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.