CCDC155 Plasmide Double Nickase (h): sc-410329-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CCDC155 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CCDC155 Double Nickase Plasmid (h) e il CCDC155 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CCDC155. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CCDC155 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410329-NIC | 20 µg | $410.00 |
CCDC155 codifica una proteina contenente un dominio coiled-coil, prevista agire come impalcatura (scaffold) a supporto delle interazioni proteina–proteina e dell’organizzazione spaziale di complessi intracellulari. Le proteine coiled-coil partecipano comunemente alla dinamica del citoscheletro, al traffico vescicolare, a processi associati al centrosoma e all’architettura nucleare, collegando CCDC155 a meccanismi fondamentali che coordinano struttura e segnalazione cellulare. Benché CCDC155 sia ancora relativamente poco caratterizzata, l’alterazione di scaffold coiled-coil può influenzare la stabilità del genoma, la progressione del ciclo cellulare e le vie di risposta allo stress, spesso modificate nelle malattie umane. Di conseguenza, CCDC155 è di interesse per analizzare reti regolatorie dipendenti dal contesto in biologia cellulare e per mappare le relazioni genotipo–fenotipo in sistemi modello.
CCDC155 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CCDC155 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CCDC155. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CCDC155. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CCDC155 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.