Caprin1 Plasmide Double Nickase (m): sc-424757-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Caprin1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Caprin1 Double Nickase Plasmid (m) e il Caprin1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Caprin1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Caprin1 Antibody (F-3): sc-518251
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Caprin1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424757-NIC | 20 µg | $410.00 |
Caprin1 (proteina 1 associata al ciclo cellulare) è una proteina conservata che lega l’RNA e contribuisce alla regolazione genica post-trascrizionale associandosi a complessi ribonucleoproteici e ai granuli di stress. Nelle cellule di topo, Caprin1 sostiene la stabilità dell’mRNA e il controllo della traduzione, collegandosi alla segnalazione proliferativa e alle risposte adattative allo stress cellulare. È stata implicata nella funzione neuronale e sinaptica, nella segnalazione legata al sistema immunitario e nella regolazione di trascritti associati al ciclo cellulare, risultando coerente con vie che coordinano crescita, differenziamento e adattamento allo stress. Un’attività di Caprin1 deregolata è stata associata in letteratura a fenotipi di neurosviluppo e a programmi di sopravvivenza cellulare alterati, rendendola rilevante per studi meccanicistici sul metabolismo dell’RNA e sull’espressione genica responsiva allo stress.
Caprin1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Caprin1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Caprin1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Caprin1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Caprin1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.