BF-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402933

Panoramica

Il gene umano **FOXG1** codifica il fattore di trascrizione della famiglia forkhead box **BF-1**, un regolatore principale del patterning telencefalico e del mantenimento dei progenitori neurali durante lo sviluppo cerebrale. BF-1 agisce principalmente come repressore trascrizionale e si integra con reti di segnalazione dello sviluppo, inclusi i programmi associati a **Notch**, **Wnt/β-catenina** e **TGF-β/BMP**, per controllare proliferazione, differenziamento e identità regionale. Attraverso la modulazione di geni del ciclo cellulare e determinanti del destino neuronale, FOXG1 influenza la neurogenesi corticale e la maturazione sinaptica. Un’attività o un dosaggio di FOXG1 deregolati sono fortemente associati a disturbi del neurosviluppo e ad alterazioni della funzione delle reti neuronali, rendendolo un bersaglio chiave per studi meccanicistici in modelli di lineaggio neuronale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BF-1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FOXG1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FOXG1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FOXG1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BF-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FOXG1 per lo studio della segnalazione di BF-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FOXG1 critici per la funzione di BF-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FOXG1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal BF-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BF-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FOXG1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal BF-1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BF-1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FOXG1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FOXG1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.