Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Bak Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400646-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BakO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Bak (h) e o Plasmídeo Double Nickase Bak (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BAK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Bak Anticorpo (AT38E2): sc-517390
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Bak Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400646-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Bak Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400646-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BAK1 codifica Bak, um efetor pró-apoptótico da família BCL-2 que se localiza na membrana externa da mitocôndria e promove a permeabilização dessa membrana após estresse celular. Quando ativado, Bak sofre uma mudança conformacional e oligomeriza, permitindo a liberação de citocromo c e a ativação subsequente de caspases na via intrínseca de apoptose. A função de Bak é rigidamente regulada por interações com proteínas BH3-only e fatores antiapoptóticos como BCL-2 e BCL-XL, conectando-o ao controle por checkpoints da sobrevivência celular e das respostas ao estresse. A desregulação da apoptose mediada por BAK1 tem sido implicada em limiares alterados de morte celular observados em contextos de pesquisa sobre biologia do câncer, neurodegeneração e homeostase imunológica.
Bak O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BAK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BAK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BAK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BAK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.