ATXN2L Plasmide Double Nickase (h): sc-406313-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ATXN2L Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ATXN2L Double Nickase Plasmid (h) e il ATXN2L Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ATXN2L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ATXN2L Plasmide Double Nickase (h) | sc-406313-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATXN2L Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406313-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATXN2L (ataxin-2-like) codifica una proteina legante l’RNA che si localizza nei granuli citoplasmatici di RNA e contribuisce al controllo post-trascrizionale dell’espressione genica, inclusi la stabilità dell’mRNA e la regolazione della traduzione. È implicata nell’assemblaggio dei granuli di stress e nelle risposte cellulari allo stress, collegando ATXN2L a vie che governano il metabolismo dell’RNA, la proteostasi e l’adattamento ai segnali ambientali. Attraverso queste funzioni, ATXN2L può influenzare i programmi di crescita e sopravvivenza cellulare ed è oggetto di studio in contesti in cui una gestione deregolata dell’RNA e la dinamica dei granuli di stress contribuiscono a fenotipi rilevanti per la malattia. ATXN2L è quindi un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla regolazione dei complessi ribonucleoproteici e sul cross-talk di segnalazione che determina lo stato cellulare.
ATXN2L Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ATXN2L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ATXN2L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ATXN2L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ATXN2L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.