ASCC1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-417767

Panoramica

ASCC1 (activating signal cointegrator 1 complex subunit 1) è un fattore nucleare implicato nella regolazione della trascrizione e nel mantenimento del genoma, e agisce all’interno del complesso coattivatore ASC-1/ASCC, che interagisce con l’espressione genica dipendente dalla RNA polimerasi II. ASCC1 è stato associato alle risposte cellulari allo stress genotossico e al coordinamento di processi legati alla riparazione del DNA, supportando la corretta progressione del ciclo cellulare e la proteostasi in condizioni di stress. L’alterazione della funzione di ASCC1 è stata associata a fenotipi di malattie neuromuscolari, in linea con un ruolo essenziale nel mantenimento dell’omeostasi tissutale e dei programmi di espressione genica nelle cellule differenziate. Di conseguenza, ASCC1 viene studiato in vie che collegano la trascrizione, la segnalazione del danno al DNA e reti regolatorie responsivi allo stress.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ASCC1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ASCC1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ASCC1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ASCC1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ASCC1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ASCC1 per lo studio della segnalazione di ASCC1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ASCC1 critici per la funzione di ASCC1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ASCC1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ASCC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ASCC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ASCC1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ASCC1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ASCC1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ASCC1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ASCC1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.