Arnt 1CRISPR激活质粒(m): sc-419204-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Arnt 1 CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Arnt 1 CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Arnt 1 CRISPR 激活质粒 (m) 和 Arnt 1 CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Arnt 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Arnt 1: sc-17811，通过WB, IF或者IHC分析
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Arnt 1CRISPR激活质粒(m) | sc-419204-ACT | 20 µg | $397.00 |
Arnt（芳香烃受体核转位蛋白），又称 ARNT1/HIF-1β，编码一种 bHLH-PAS 转录因子，可与 AHR、HIF-1α 等伙伴蛋白形成异源二聚体，从而协调外源性化合物应答和氧感知相关的基因程序。在小鼠细胞中，ARNT 整合环境与代谢信号，调控控制血管生成信号、糖酵解代谢、线粒体适应以及细胞分化的转录网络。通过 AHR/ARNT 轴，它可调节解毒通路（包括细胞色素 P450 的诱导）；而在 HIF 通路中，它支持缺氧应答的转录调控。ARNT 依赖性信号的失调常被用作在临床前模型中研究炎症、血管重塑和肿瘤相关缺氧适应的机制切入点，但不意味着具有临床结局上的指向。
Arnt 1 CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Arnt的表达。
Arnt 1 CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Arnt基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Arnt转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Arnt 1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Arnt位点，并能够研究内源性位点上依赖于Arnt 1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Arnt表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Arnt 1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。