Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ARID3A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404552
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARID3A Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ARID3A, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ARID3A Antibody (A-4): sc-398367
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARID3A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-404552 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ARID3A (AT-rich interaction domain 3A) è un fattore di trascrizione legante il DNA che regola l’accessibilità della cromatina e programmi di espressione genica specifici di linea. Nei sistemi ematopoietici è strettamente associato allo sviluppo delle cellule B e alla regolazione dei geni delle immunoglobuline, integrandosi con reti trascrizionali che coordinano differenziamento, proliferazione e apoptosi. L’attività di ARID3A influenza il controllo epigenetico dei loci bersaglio e può modificare le risposte cellulari a segnali di sviluppo e di stress. Un’espressione o una funzione deregolata di ARID3A è stata associata ad alterazioni dei fenotipi delle cellule immunitarie ed è stata studiata in contesti che includono neoplasie ematologiche e autoimmunità.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ARID3A (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ARID3A in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ARID3A insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ARID3A a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ARID3A.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ARID3A per lo studio della segnalazione di ARID3A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ARID3A critici per la funzione di ARID3A
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ARID3A per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ARID3A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ARID3A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ARID3A. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ARID3A Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ARID3A (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ARID3A per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ARID3A definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.