Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Arg Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-418936
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Arg Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Arg, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Arg Antibody (1H1B11): sc-81154
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Arg Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-418936 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Abl2 del topo codifica la tirosin-chinasi non recettoriale Arg, uno stretto paralogo di ABL1 che integra i segnali provenienti dai recettori dei fattori di crescita e dai complessi di adesione per controllare il rimodellamento del citoscheletro di actina. Arg regola processi cellulari tra cui migrazione, crescita dei neuriti, endocitosi e risposte allo stress ossidativo e meccanico, collegando eventi di fosforilazione alla segnalazione delle GTPasi della famiglia Rho e delle adesioni focali. Grazie al suo ruolo nella dinamica del citoscheletro e nelle interazioni cellula–cellula/cellula–matrice, Arg è spesso studiata in contesti di comportamento cellulare invasivo e di segnalazione chinasi aberrante. Un’attività deregolata della famiglia ABL e l’alterazione di vie dipendenti da Abl2 sono state associate a fenotipi oncogeni e a disfunzioni neurobiologiche in modelli sperimentali.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Arg (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Abl2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Abl2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Abl2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Arg.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Abl2 per lo studio della segnalazione di Arg, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Abl2 critici per la funzione di Arg
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Abl2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Arg CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Arg CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Abl2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Arg Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Arg (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Abl2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Abl2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.