ANP32B Plasmide Double Nickase (m): sc-426661-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ANP32B Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ANP32B Double Nickase Plasmid (m) e il ANP32B Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Anp32b. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ANP32B Plasmide Double Nickase (m) | sc-426661-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANP32B Plasmide Double Nickase (m2) | sc-426661-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Anp32b codifica la proteina nucleare fosforilata acida 32, membro B della famiglia (ANP32B), una proteina nucleare conservata che partecipa alla regolazione della trascrizione associata alla cromatina, al processamento dell’RNA e al controllo del ciclo cellulare. ANP32B è stata collegata alla modulazione della dinamica dell’acetilazione degli istoni e della segnalazione delle fosfatasi proteiche, sostenendo programmi che influenzano proliferazione, differenziamento e risposte allo stress cellulare. Nei sistemi murini, l’alterazione di Anp32b può incidere sulla suscettibilità all’apoptosi e sugli output trascrizionali infiammatori o antivirali, rendendola rilevante per studi di biologia tumorale, neurobiologia e interazioni ospite–patogeno. La sua localizzazione nucleare e le caratteristiche simili a quelle di una proteina “scaffold” rendono inoltre ANP32B un nodo utile per analizzare i meccanismi di regolazione epigenetica e le vie del metabolismo dell’RNA.
ANP32B Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Anp32b nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Anp32b. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Anp32b. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Anp32b interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.