ABCG1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401237-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABCG1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABCG1 Double Nickase Plasmid (h) e il ABCG1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABCG1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABCG1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401237-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABCG1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401237-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCG1 codifica un trasportatore della famiglia ATP-binding cassette che regola l’omeostasi intracellulare di colesterolo e fosfolipidi promuovendo l’efflusso lipidico verso accettori extracellulari, contribuendo a mantenere la composizione di membrana e l’equilibrio lipidico cellulare. Nei macrofagi e in altri tipi cellulari, l’attività di ABCG1 si interseca con il trasporto inverso del colesterolo e con la segnalazione dei recettori nucleari, inclusi i programmi trascrizionali regolati da LXR/RXR che rispondono al carico di steroli. Influenzando la composizione dei lipid raft e la segnalazione infiammatoria, ABCG1 contribuisce a vie che collegano il metabolismo lipidico con le risposte immunitarie innate e lo stress ossidativo. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ABCG1 sono state associate a fenotipi legati alla dislipidemia e a meccanismi di malattia cardiometabolica, a supporto del suo impiego come bersaglio in studi sulla biologia dell’aterosclerosi e sull’infiammazione guidata dai lipidi.
ABCG1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABCG1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABCG1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABCG1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABCG1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.