Plasmide Double Nickase (h) VEGF-C: sc-400553-NIC

VEGFC code pour le VEGF‑C, un facteur de croissance sécrété qui signale principalement via le VEGFR‑3 (FLT4) et qui, après maturation protéolytique, peut également se lier au VEGFR‑2 afin de réguler la migration et la survie des cellules endothéliales ainsi que la perméabilité vasculaire. Le VEGF‑C est un moteur central de la lymphangiogenèse et contribue au remodelage des vaisseaux sanguins et lymphatiques via des cascades de signalisation de récepteurs tyrosine kinases, notamment MAPK/ERK et PI3K/AKT. Une activité de VEGF‑C dérégulée est associée à des altérations du développement lymphatique, à une perturbation de l'homéostasie des fluides tissulaires et à des modifications du microenvironnement inflammatoire, et elle est fréquemment étudiée dans le contexte de la lymphangiogenèse associée aux tumeurs et de la dissémination métastatique. Ces fonctions font du VEGF‑C une cible courante dans les études de biologie vasculaire, de trafic des cellules immunitaires et de remodelage vasculaire dépendant de la matrice extracellulaire.

VEGF-C Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus VEGFC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de VEGFC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de VEGFC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de VEGFC.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.