USP51 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-414805

Panoramica

USP51 codifica una proteasi specifica per l’ubiquitina che partecipa alla deubiquitinazione, un passaggio regolatorio chiave che controlla la stabilità, la localizzazione e l’output di segnalazione delle proteine. Invertendo la coniugazione dell’ubiquitina, USP51 può influenzare la proteostasi e la dinamica dei complessi multiproteici, con effetti a valle sulla progressione del ciclo cellulare, sulle risposte al danno al DNA e sulla segnalazione adattativa allo stress. Un’attività alterata delle deubiquitinasi è spesso associata alla disregolazione del sistema ubiquitina–proteasoma osservata nella biologia dei tumori e in altri disturbi che coinvolgono instabilità genomica o segnalazione aberrante. USP51 è quindi di interesse per analizzare la regolazione delle vie dipendenti dall’ubiquitina e identificare dipendenze specifiche di contesto in modelli cellulari umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO USP51 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene USP51 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del USP51 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto USP51 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina USP51.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di USP51 per lo studio della segnalazione di USP51, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni USP51 critici per la funzione di USP51
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di USP51 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal USP51 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal USP51 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus USP51. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal USP51 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR USP51 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia USP51 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio USP51 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.