TRPS1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403037-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TRPS1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TRPS1 Double Nickase Plasmid (h) e il TRPS1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TRPS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TRPS1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403037-NIC | 20 µg | $410.00 |
TRPS1 codifica un fattore di trascrizione a dita di zinco di tipo GATA che durante lo sviluppo agisce principalmente come repressore trascrizionale, integrando segnali che modellano la differenziazione epiteliale e la definizione degli schemi scheletrici. TRPS1 regola programmi genici coinvolti nella maturazione dei condrociti, nella morfogenesi del follicolo pilifero e nel controllo del ciclo cellulare attraverso interazioni dipendenti dal contesto con complessi di rimodellamento della cromatina e complessi corepressori. Nella biologia umana, un’alterata espressione o funzione di TRPS1 è associata alle sindromi trico-rino-falangee ed è stata collegata a reti trascrizionali deregolate nei tessuti epiteliali ormono-responsivi, rendendola rilevante per studi sulla specificazione di linea e sul controllo trascrizionale. In quanto proteina nucleare che si lega al DNA, TRPS1 è frequentemente studiata nei pathway che governano differenziamento, proliferazione ed espressione genica specifica di tessuto.
TRPS1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TRPS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TRPS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TRPS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TRPS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.