TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405261

Übersicht

TP53INP2 (tumor protein p53 inducible nuclear protein 2), auch bekannt als DOR, ist ein stressresponsiver Kofaktor, der an der Koordination von Autophagie- und Transkriptionsprogrammen beteiligt ist. Es wirkt an der Biogenese und am Transport von Autophagosomen mit, indem es mit ATG-Proteinen und Mitgliedern der LC3-Familie interagiert, und verknüpft so die Nährstoffsensorik mit dem lysosomalen Abbau und der zellulären Qualitätskontrolle. TP53INP2 wurde außerdem mit der Regulation der kernrezeptorabhängigen Genexpression sowie mit adaptiven Antworten auf oxidativen und metabolischen Stress in Verbindung gebracht. Eine dysregulierte TP53INP2-Aktivität wird mit verändertem autophagischem Flux und gestörter zellulärer Homöostase assoziiert – Prozesse, die häufig in Modellen der Krebsbiologie, Neurodegeneration und metabolischer Erkrankungen untersucht werden.

Das TP53INP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TP53INP2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TP53INP2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TP53INP2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TP53INP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TP53INP2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TP53INP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TP53INP2-Exone abzielen, die für die TP53INP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TP53INP2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TP53INP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TP53INP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TP53INP2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TP53INP2 HDR-Plasmid (h) und TP53INP2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TP53INP2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TP53INP2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.