TP53INP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405261

Panoramica

TP53INP2 (tumor protein p53 inducible nuclear protein 2), noto anche come DOR, è un cofattore sensibile allo stress implicato nel coordinamento dell’autofagia e dei programmi trascrizionali. Partecipa alla biogenesi e al traffico degli autofagosomi attraverso interazioni con proteine ATG e membri della famiglia LC3, collegando il sensing dei nutrienti al turnover lisosomiale e al controllo di qualità cellulare. TP53INP2 è stato inoltre associato alla regolazione dell’espressione genica dipendente dai recettori nucleari e alle risposte adattative allo stress ossidativo e metabolico. Un’attività deregolata di TP53INP2 è stata collegata ad alterazioni del flusso autofagico e dell’omeostasi cellulare, processi frequentemente studiati in modelli di biologia del cancro, neurodegenerazione e malattie metaboliche.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TP53INP2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TP53INP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TP53INP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TP53INP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TP53INP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TP53INP2 per lo studio della segnalazione di TP53INP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TP53INP2 critici per la funzione di TP53INP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TP53INP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TP53INP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TP53INP2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TP53INP2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TP53INP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TP53INP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.